探讨左旋肉碱通过内质网应激途径对人晶状体上皮细胞凋亡产生的影响。

实验研究。选取人晶状体细胞株（HLE-B3），利用H₂O₂处理12 h建立氧化应激模型，诱导内质网应激产生。实验分为4组：H₂O₂组、左旋肉碱（100 μmol/L）+H₂O₂组、磷酸盐缓冲液（PBS）组和左旋肉碱（100 μmol/L）组，其中PBS组和左旋肉碱组为对照组。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测不同浓度（200、400、600、800 μmol/L）H₂O₂作用下各组HLE-B3细胞活力。根据CCK-8结果选择适宜的H₂O₂浓度（400 μmol/L）处理细胞，采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率；实时定量（RT）-PCR和Western印迹分别检测各组细胞内半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）及葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在mRNA及蛋白水平的表达。4组数据的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。

CCK-8法检测结果显示，当H₂O₂浓度分别为200、400、600、800 μmol/L时，HLE-B3细胞存活率H₂O₂组（77.6%±0.8%，58.1%±3.1%，39.2%±1.5%，28.1%±2.2%）、左旋肉碱+H₂O₂组（83.3%±4.2%，74.5%±3.1%，46.4%±1.7%，32.4%±1.2%）、PBS组（97.6%±2.1%，98.3%±0.2%，96.3%±2.2%，98.5%±1.1%）、左旋肉碱组（98.5%±1.3%，96.1%±2.1%，98.1%±0.2%，97.3%±1.4%）4组比较差异均有统计学意义（均P<0.05），PBS组和左旋肉碱组两组间比较差异均无统计学意义（均P>0.05）；当H₂O₂浓度为400 μmol/L时，左旋肉碱+H₂O₂组细胞存活率高于H₂O₂组，差异有统计学意义（t=18.14，P=0.020），且H₂O₂组细胞存活率接近50%，但随着H₂O₂浓度的进一步增加，左旋肉碱+H₂O₂组与H₂O₂组相比差异无统计学意义（均P>0.05）。选取H₂O₂浓度为400 μmol/L，流式细胞仪检测结果显示H₂O₂组、左旋肉碱+H₂O₂组、PBS组和左旋肉碱组细胞凋亡率依次为31.4%±4.5%、16.5%±2.8%、2.1%±0.2%、1.9%±1.8%，4组比较差异有统计学意义（F=126.784，P=0.024），左旋肉碱+H₂O₂组凋亡率低于H₂O₂组，差异有统计学意义（t=24.67，P=0.013），PBS组和左旋肉碱组两组间差异无统计学意义（P>0.05）；RT-PCR结果显示，左旋肉碱+H₂O₂组caspase-3、GRP78的mRNA表达量均低于H₂O₂组（0.424±0.041比0.752±0.203，0.521±0.223比0.821±0.103），差异均有统计学意义（t=27.92，P=0.018；t=16.31，P=0.019）；Western印迹结果显示，左旋肉碱+H₂O₂组caspase-3、GRP78的蛋白表达量均低于H₂O₂组（0.712±0.212比1.126±0.251，0.512±0.012比0.735±0.051），差异均有统计学意义（t=15.43，P=0.010；t=20.62，P=0.018）。

左旋肉碱能够通过抑制内质网应激途径降低人晶状体细胞的凋亡率。（中华眼科杂志，2018，54：363-368）