探讨柯里拉京对胶质瘤U251细胞及胶质瘤干细胞增殖及核因子-κB(NF-κB) P65、NF-κB抑制蛋白(IκB-α)表达的影响。
方法采用免疫磁珠法从胶质瘤U251细胞中分选、培养胶质瘤干细胞。使用不同浓度(0、25、50、100 μg/mL)柯里拉京处理胶质瘤U251细胞及胶质瘤干细胞48 h，显微镜下观察其形态变化，采用CCK-8法检测细胞存活率，采用双荧光素酶报告法检测细胞中P65基因启动子表达情况，采用Western blotting检测细胞浆中IκB-α蛋白及细胞核中NF-κB P65蛋白表达情况。
结果(1)镜下观察显示：柯里拉京干预胶质瘤U251细胞及胶质瘤干细胞后，细胞出现皱缩，细胞密度降低，结构不完整，并可见较多散在的细胞碎片。(2)CCK-8法检测显示：随着柯里拉京浓度(0、25、50、100 μg/mL)的增加，胶质瘤U251细胞及胶质瘤干细胞的存活率逐渐降低，各浓度间差异均有统计学意义(P<0.05)；在相同浓度条件下，胶质瘤干细胞存活率明显低于胶质瘤U251细胞，差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)双荧光素酶报告法检测显示：与0 μg/mL柯里拉京组相比，25 μg/mL柯里拉京干预后胶质瘤U251细胞及胶质瘤干细胞P65基因启动子表达明显增多，差异均有统计学意义(P<0.05)；但50、100 μg/mL柯里拉京组P65基因启动子表达逐渐减少，各浓度间差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)Western blotting检测显示：随着柯里拉京浓度(0、25、50、100 μg/mL)的增加，胶质瘤U251细胞及胶质瘤干细胞细胞浆中IκB-α蛋白表达逐渐降低，而细胞核中NF-κB P65蛋白表达逐渐增多，各浓度间差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论柯里拉京能抑制P65基因启动子表达，诱导IκB-α蛋白表达，减少活化的NF-κB P65蛋白进入细胞核内，进而产生抑制NF-κB信号通路的作用，这可能是其抑制胶质瘤细胞及胶质瘤干细胞增殖的重要机制之一。