探讨载脂蛋白E(ApoE)对星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的作用及机制。
方法(1)体外培养C57BL/6J种属的ApoE基因敲除型(ApoE-/-)和野生型(WT)乳鼠的星形胶质细胞后，利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体行免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞，利用MMP-9抗体行免疫荧光染色检测星形胶质细胞是否定性表达MMP-9。(2)将2种乳鼠的星形胶质细胞分别分为对照组、活化组、抗体1组、抗体2组、抗体3组、抗体4组，对照组不进行任何干预，活化组加入百日咳毒素、热灭活的结核分枝杆菌H37Ra刺激，抗体1~4组在活化组的基础上分别加入抗白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)抗体以抑制其相应的炎症因子。采用ELISA法检测各组星形胶质细胞MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)浓度以及IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-12等炎症因子浓度。
结果(1)2种乳鼠的星形胶质细胞均定性表达MMP-9，其中活化组MMP-9浓度均较对照组明显升高，差异均有统计学意义(P< 0.05)；抗体1~4组MMP-9浓度均较活化组明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；ApoE-/-乳鼠的活化组MMP-9浓度明显高于WT乳鼠的活化组，差异有统计学意义(P<0.05)。TIMP-1浓度在各组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)2种乳鼠的活化组IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-12等炎症因子浓度均较对照组明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；抗体1组IL-6浓度、抗体2组IFN-γ浓度、抗体3组TNF-α浓度、抗体4组IL-12浓度均较活化组明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；ApoE-/-乳鼠的活化组IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-12等炎症因子浓度均明显高于WT乳鼠的活化组，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论ApoE可通过调节星形胶质细胞分泌炎症因子影响MMP-9的表达，从而影响血脑屏障的完整性。