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为了建立马耳他布氏杆菌M5—90株弱毒疫苗株与野生株的鉴别诊断，本研究以bp26基因作为重组靶位点，以M5—90为亲本，利用bp26基因ORF外侧序列作为同源序列，将卡那霉素抗性基因（Kan^r）整合到细菌基因组中，双交叉重组阳性菌株，经SDS-PAGE和western blot试验表明迁移率约为29ku的BP26蛋白在亲本菌中表达并可被鼠抗BP26高免血清识别，而突变株M5—90-26反应结果为阴性，表明BP26蛋白在突变疫苗株M5-90-26中未表达。M5-90—26具备从血清学角度区分M5—90-2