糖尿病并发症相关基因醛糖还原酶酵母细胞模型的建立

来源 :中国老年学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Flying_wind
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目的构建由绿色荧光蛋白(GFP)标记的糖尿病慢性并发症相关基因醛糖还原酶(AR)表达载体,并在酵母细胞中表达,建立AR抑制剂筛选模型.方法构建AR与GFP的嵌合基因,将此AR::GFP嵌合基因克隆到酵母表达载体pYEX-BX中,再将重组载体pYEX-BX-AR::GFP转化至酵母宿主菌INVSC1,在SC-UD选择性培养基中表达AR::GFP.结果 PCR扩增出约1 106 bp大小片段,为AR基因片段;RT-PCR在酵母细胞中检测到AR mRNA的表达;经CuSO4诱导后可见AR::GFP融合蛋白的绿色
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