表达禽流感病毒HA蛋白及传染性法氏囊病毒VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒的构建

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cxy153
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为构建同时表达禽流感病毒(AIV)HA蛋白及传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(r HVT),本研究以本实验室构建的连续覆盖火鸡疱疹病毒(HVT)全基因组的5个重组粘粒(p Fos A、p Fos B、p Fos C、p Fos D和p Fos E)为基础,利用猪捷申病毒2A蛋白的编码序列,将HA基因和VP2基因串联,并克隆于p CAGGs载体中,构建重组质粒p CA-HA-2A-VP2。利用Gateway LR克隆技术,将重组质粒中的HA-2A-VP2的表达盒(Pec-HA-2A-VP2-POLYA)插入到p Fos C粘粒中HVT片段的复制非必需区HVT053与HVT054基因之间,构建重组粘粒p Fos C-5354-HA-VP2。将p Fos A、p Fos B、p Fos D、p Fos E和p Fos C-5354-HA-VP2 5个重组粘粒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),制备表达HA蛋白及VP2蛋白的重组火鸡疱疹病毒(r HVT-5354-HA-VP2)。将重组病毒在CEF中连续传至20代后,通过PCR、间接免疫荧光和western blot鉴定分析,结果显示HA与VP2基因能够在重组病毒中稳定存在并正确表达;生长动力学结果表明,重组病毒在CEF中的增殖效率与野生型病毒HVT无显著差异。该重组病毒的制备为研制AIV-IBDV-马立克病毒三联苗奠定了基础。
其他文献
目的:探究汉防己甲素联合乙酰半胱氨酸泡腾片治疗矽肺临床效果。方法:收治矽肺患者56例,分为两组各28例。对照组实施常规的药物治疗,试验组给予汉防己甲素联合乙酰半胱氨酸泡
语文课要怎么上,站在一旁能说会道的多,将课堂调弄得活色生香的少。其实,教学过程符合语文课堂程序和规格的也不多。许多教育专家希望通过名优教师开设展示课来改变这一现状,
帕金森病(PD)是一种常见的神经系统退行性疾病,其发病病因及机制尚不明确,目前治疗方案仅可缓解症状,不能阻止疾病进展。多项国内外的回顾性及前瞻性研究表明,PD发病风险与日
对于马克思哲学和德国理念论之间的关系,已有众多的研究。论者们多从思想发生学的角度讨论马克思哲学与康德、费希特、黑格尔哲学等特定思想的关系。本文通过对德国理念论奠
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
目的观察芦黄颗粒对动脉粥样硬化患者动脉功能、血脂、血液流变性及血清炎症因子的影响。方法将符合纳入标准的动脉粥样硬化患者60例随机分为治疗组及对照组,每组30例;治疗组
【正】 在古老的地理学萌芽中,商业地理知识曾是最重要的组成部分之一。经过三次社会大分工和劳动地域分工的进展,生产迅速发展,商品交换日益频繁和扩大范围,促使商业地理学