肿瘤坏死因子-α诱导蛋白3-受体作用蛋白-半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-8凋亡传导在肝癌细胞对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体耐受中的作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zw840909
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目的 探讨肿瘤坏死因子-α诱导蛋白3(A20)及受体作用蛋白(RIP)沉默增加肝癌细胞HepG2对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性的分子机制.方法 合成针对A20基因和RIP基因的特异性小干扰RNA(siRNA)并转染至肝癌细胞HepG2中,应用酸性磷酸酶(AP)法检测A20-siRNA或RIP-siRNA联合TRAIL对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用以及Westernblot检测对半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8蛋白表达的影响.结果 成功合成A20-siRNA和RIP-siRNA并转染入HepG2细胞中.A20-siRNA与TRAIL联合处理HepG2细胞可活化RIP、Caspase-8和Caspase-3,诱导细胞凋亡.RIP-siRNA联合TRAIL可以明显抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05).另外RIP-siRNA联合TRAIL作用HepG2后可活化Caspase-8.结论 A20和RIP的表达是肝癌细胞对TRAIL耐受的主要原因,A20-siRNA或RIP-siRNA可以有效抑制肝癌HepG2细胞A20及RIP基因的表达,并增加TRAIL对肝癌HepG2细胞凋亡的诱导作用;其机制是通过“A20-RIP-Caspase-8”反应链序列调控活化下游Caspase-8,活化诱导的死亡受体传导通路来实现的。

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