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应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体

来源 :天津医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wlxqzs

【摘 要】

：

目的：构建铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn superoxide dismutase, SOD1）-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法（SOEing）分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因，然

【作 者】

：

陆玉成 车峰远 苏全平 尤翠平 王龙 王富敏 于继徐 

【机 构】

：

山东省临沂市人民医院神经病学实验室,山东省临沂市人民医院神经内科

【出 处】

：

天津医药

【发表日期】

：

2013年12期

【关键词】

：

超氧化物歧化酶 点突变 质粒 DNA 重组 肌萎缩侧索硬化 重叠区扩增基因拼接法 

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目的：构建铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn superoxide dismutase, SOD1）-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法（SOEing）分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因，然后将2段基因拼接起来，得到SOD1-G93A基因，并克隆至pcDNA3.1（-）真核表达载体上。结果成功扩增出SOD1-G93A基因，测序结果与GenBank完全一致；对重组质粒SOD1-G93A-pcDNA3.1（-）进行双酶切鉴定，测序结果与预期完全一致。结论成功构建了SOD1-G93

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