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对ALLOXAN法、DTNB法和亚硝基铁氰化钠3种方法进行了改进与比较。结果表明，DTNB法用于酵母提取液中谷胱甘肽的测定具有显著优势。研究了不同因素对测定结果的影响，得出了合适的测定条件。DT-NB法准确度和精确度良好，回收率和理论回收率无显著差异，且添加甲醛后DTNB法能消除半胱氨酸的干扰，是一种低成本、简单、快速的用于酵母提取液中还原型谷胱甘肽测定的方法。