【摘 要】
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目的 观察胚胎干性相关基因Oct4和Nanog在胰腺癌干细胞中的表达变化及意义.方法 将人胰腺癌细胞株PANC-1制备成单细胞悬液,予以CD24、CD44抗体孵育,经流式细胞分选仪分选出CD
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目的 观察胚胎干性相关基因Oct4和Nanog在胰腺癌干细胞中的表达变化及意义.方法 将人胰腺癌细胞株PANC-1制备成单细胞悬液,予以CD24、CD44抗体孵育,经流式细胞分选仪分选出CD24+CD44+的胰腺癌干细胞,显微镜下观察于细胞球形成率；以含10％胎牛血清(FBS)培养液诱导干细胞球细胞分化,流式检测CD24和CD44的表达；将细胞分成双阳性干细胞组和未分选组,反转录-PCR和定量PCR检测胚胎干性相关基因Oct4和Nanog mRNA在胰腺癌干细胞中的转录差异；免疫荧光法检测Oct4和Nanog的表达情况；用CCK8法检测上述两组细胞在体外对化疗药物耐受的差异.结果 在人胰腺癌细胞株PANC-1中成功分离出1％～3％ CD24+CD44+的胰腺癌干细胞,在于细胞培养基中呈悬浮球状生长,且与未分选组(93±5)‰相比具有较高的干细胞球形成率[(122±6)‰,P＜0.05],经过血清诱导分化,细胞逐渐恢复原代细胞形态,且CD24、CD44表达下降；胚胎干性相关基因Oct4和Nanog在双阳性干细胞组中高表达；CD24+ CD44+干细胞具有更强的化疗耐受能力(P＜0.05).结论 CD24+ CD44+细胞具有胰腺癌干细胞特性及高耐药性,胚胎干性相关基因Oct4和Nanog在胰腺癌干细胞中高表达且与胰腺癌干细胞干性的维持及高耐药性可能存在高度相关性.
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