重组假丝酵母尿酸氧化酶等电点毛细管等电聚焦检测方法的建立及验证

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoyuzxcv123
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目的 建立检测重组假丝酵母尿酸氧化酶等电点(isoelectric point,pI)的毛细管等点聚焦(capillary isoelectrie focusing,cIEF)方法,并进行验证。方法 通过优化cIEF过程中稳定剂比例、聚焦时间等参数,建立cIEF方法,并对方法的专属性、精密度、准确性、耐用性进行验证。结果 确定稳定剂精氨酸(arginine,ARG)︰亚氨基二乙酸(iminodiacetic acid,IDA)比例60μL︰6μL,聚焦时间15 min为最适条件。样品基质在重组假丝酵母尿酸氧化酶主峰位置无干扰峰;重复性、中间精密度、批间精密度验证相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为0.81%~0.87%、0.91%~1.5%和0%~0.79%;3-10两性电解质载体、cIEF凝胶、毛细管柱等物料批号改变,方法不受影响。结论 建立的cIEF方法专属性、精密度、准确度、耐用性良好,适用于重组假丝酵母尿酸氧化酶pI的检测。
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