探讨RNA靶向沉默Notch1基因对肾透明细胞癌的增殖、凋亡及蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( protein kinase B/mammalian target of rapamycin，Akt/mTOR)信号通路的影响。
方法设计针对Notch1基因小干扰RNA(siRNA)片段，经脂质体转染入786-O细胞，RT-PCR及蛋白印迹法检测其干扰效果；MTT法绘制细胞生长曲线，TUNEL法分析细胞凋亡，蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、procaspase-3及Akt/mTOR信号途径相关蛋白Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、磷酸化P70核糖体蛋白S6激酶(Phosphorylation P70 ribosomal protein S6 kinase，p-P70S6K)的表达。
结果Notch1 siRNA转染786-O细胞后，Notch1基因的mRNA、蛋白表达均明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)。经Notch1 siRNA 0、40、60、80、100、120 nmol/L作用24 h后，786-O细胞的增殖率分别为(98.51±1.33 )%、(87.34±2.26)%、(64.72±3.24%)%、(57.68±3.32%)%、(31.91±1.85 )%、(19.27±2.73 )%，随Notch1 siRNA浓度的增加细胞增殖率下降，差异有统计学意义(F＝47.65，P<0.01)。0、40、80、120 nmol/L Notch1 siRNA处理786-O细胞24 h后，凋亡率分别为(7.6±3.8)%、(21.5±4.8 )%、(32.3±3.5)%、(46.3±4.7%)%，随着Notch1 siRNA浓度的增加细胞凋亡率增加，差异有统计学意义(P<0.05)；凋亡相关蛋白Bcl-2、pro-caspase 3的表达下降；干扰Notch1基因后Akt总蛋白未见明显变化，而p-Akt、p-mTOR、p-P70S6K的表达下降。
结论靶向沉默Notch1基因后，可抑制786-O细胞增殖，诱导细胞凋亡；沉默Notch1基因可通过去磷酸化抑制该Akt/mTOR信号通路。