【摘 要】
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目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染对乙酰胆碱酯酶(AchE)表达水平的影响以及细胞内AchE活性的变化对HCV感染的影响。方法以细胞培养来源的HCV(HCVcc)感染人肝癌细胞系Huh7细胞,
【机 构】
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海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室上海市医学生物防护重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31570170);国家科技重大专项(2017ZX10304403-6/7)~~
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目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染对乙酰胆碱酯酶(AchE)表达水平的影响以及细胞内AchE活性的变化对HCV感染的影响。方法以细胞培养来源的HCV(HCVcc)感染人肝癌细胞系Huh7细胞,用蛋白质印迹法以及实时荧光定量PCR(qPCR)进一步验证HCV感染对AchE表达水平的影响,AchE活性检测试剂盒检测细胞内AchE活性的变化。以AchE抑制剂多奈哌齐和伊托必利处理Huh7细胞,同时用HCVcc感染,通过蛋白质印迹法以及免疫荧光法检测Huh7细胞的HCV感染情况。用针对AchE基因的小干扰RNA(siRNA)转染Huh7细胞,随后用HCVcc感染Huh7细胞,通过蛋白质印迹法和免疫荧光法检测AchE的表达以及HCV感染情况。结果 HCVcc感染Huh7细胞60 h后,AchE蛋白表达水平升高,同时酶活性也增强(P均<0.01)。AchE抑制剂呈浓度依赖性抑制HCV对Huh7细胞的感染(P<0.01)。用siRNA敲低AchE的表达后,HCV对Huh7细胞的感染降低(P<0.01)。结论 HCV感染Huh7细胞能上调AchE的表达并增强AchE活性,AchE表达增加和活性增强都能促进HCV的感染,表明AchE在HCV感染Huh7细胞的过程中起着正反馈增强感染的作用。
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