【摘 要】
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目的 建立从血浆冷沉淀中同时制备因子Ⅷ(factorⅧ,FⅧ)、纤维结合蛋白(fibronectin,Fn)和纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)的方法.方法 用缓冲液溶解抽提冷沉淀,获得的冷沉淀抽提液通过2次DEAE离子交换层析和1次聚乙二醇沉淀进行分离纯化来同时制备FⅧ、Fn和Fg.采用FⅧ∶C活性测定试剂盒检测制备的FⅧ活性,并计算FⅧ比活和回收率.分别用双向和单向免疫扩散试验对制备的F
【机 构】
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200052,上海生物制品研究所有限责任公司第五研究室,200052,上海生物制品研究所有限责任公司第五研究室,200052,上海生物制品研究所有限责任公司第五研究室
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目的 建立从血浆冷沉淀中同时制备因子Ⅷ(factorⅧ,FⅧ)、纤维结合蛋白(fibronectin,Fn)和纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)的方法.方法 用缓冲液溶解抽提冷沉淀,获得的冷沉淀抽提液通过2次DEAE离子交换层析和1次聚乙二醇沉淀进行分离纯化来同时制备FⅧ、Fn和Fg.采用FⅧ∶C活性测定试剂盒检测制备的FⅧ活性,并计算FⅧ比活和回收率.分别用双向和单向免疫扩散试验对制备的Fn和Fg进行定性和定量检测,并计算回收率.结果 制备的FⅧ的平均活性为16.48 U/ml,平均比活为29.84 U/mg,回收率＞60％.制备的Fn和Fg的蛋白纯度均＞90％,回收率分别为＞80％和＞75％.结论 采用建立的方法可从冷沉淀中同时制备FⅧ、Fn和Fg。
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