【摘 要】
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目的研究自噬在白藜芦醇抑制肝细胞脂肪变性中的作用。方法用0.2 mmol/L软脂酸钠(palmitic acid sodium,PA)处理人肝癌细胞株(HepG2)细胞24 h建立肝细胞脂肪变性模型,再用40
【机 构】
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第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆市医学营养研究中心,
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目的研究自噬在白藜芦醇抑制肝细胞脂肪变性中的作用。方法用0.2 mmol/L软脂酸钠(palmitic acid sodium,PA)处理人肝癌细胞株(HepG2)细胞24 h建立肝细胞脂肪变性模型,再用40μmol/L白藜芦醇(resveratrol,RSV)单独或加入5 mmol/L自噬特异抑制(3-methyladenine,3-MA)处理24 h。实验分为对照组、PA组、PA+RSV组和PA+3-MA+RSV组。培养终止后,用CCK-8法检测细胞增殖活力,油红O染色法检测各组细胞内脂质蓄积情况,细胞脂质比色法定量检测试剂盒分析细胞脂质含量,激光共聚焦显微镜观察溶酶体,透射电镜检测自噬体,Western blot法检测自噬标志蛋白MAP1LC3B2的表达水平。结果 0.2 mmol/L PA和40μmol/L RSV对HepG2细胞增殖活力无显著影响(P>0.05),PA处理显著增加肝细胞脂质蓄积;而RSV处理能显著上调肝细胞内MAP1LC3B2蛋白的表达水平,同时促进肝细胞内自噬体和溶酶体的形成,并显著降低PA诱导的肝细胞脂质蓄积(P<0.05);加入3-MA处理后,能明显抑制RSV对MAP1LC3B2蛋白表达的上调作用,并显著减少RSV诱导的自噬体和溶酶体数量增加(P<0.05)。结论 RSV能通过诱导自噬而改善PA引起的肝细胞脂肪变性。
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