P48L和D74N突变对p16基因功能的影响

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：june_jt

【摘要】

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应用DNA聚合酶链式反应(PCR)技术,对p16抑癌基因(CDKN2)进行体外定点突变,在p16cDNA中引入第48位密码子CCG(Pro)→CTG(Leu)和第74位密码子GAC(Asp)→AAC(Asn)突变,构建了p16-

【作者】

：

黄长晖傅继梁

【机构】

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第二军医大学医学分子遗传学军队重点实验室,第二军医大学医学分子遗传学军队重点实验室上海200433,上海200433

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

1998年3期

【关键词】

：

P16基因体外定点突变基因表达细胞周期 p16 gene site-directed mutagenesis expression cell cyc

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应用DNA聚合酶链式反应(PCR)技术,对p16抑癌基因(CDKN2)进行体外定点突变,在p16cDNA中引入第48位密码子CCG(Pro)→CTG(Leu)和第74位密码子GAC(Asp)→AAC(Asn)突变,构建了p16-P48L和p16-D74N突变体。野生型和突变型p16 cDNA克隆于pcDNA3构建pCMV-p16、pCMV-p16P48L和pCMV-p16D74N真核表达载体,导入纯合缺失p16基因的人肺癌细胞株H460,经RNA点杂交、RNA印迹和细胞免疫化学染色,检测到P16表达。通过

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