探讨瑞替加滨(M型钾离子通道开放剂)对急性脑缺血再灌注损伤的脑保护作用及其可能机制。
方法将70只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术组(n=10)、大脑中动脉闭塞(MCAO)组(n=10)和干预组(n=50)，再按照给予药物和给药时间的不同将干预组分为XE991(M型钾离子通道阻滞剂)组、瑞替加滨0 h组、瑞替加滨1 h组、瑞替加滨3 h组及瑞替加滨6 h组，每组10只。MCAO组和干预组采用线栓法制作小鼠MCAO模型，于脑缺血90 min后再灌注。干预组相应给予瑞替加滨(10.5 mg/kg)及XE991(3.0 mg/kg)，假手术组和MCAO组给予等量生理盐水。造模后24 h，采用TTC染色检测各组脑梗死体积，采用HE染色观察海马CA1区神经元形态变化，采用Western blotting检测缺血半影区细胞膜蛋白CD40L表达量，采用TUNEL法计数海马区凋亡神经元。
结果假手术组未发现脑梗死病灶，海马神经元形态无明显改变，无CD40L蛋白表达，TUNEL阳性细胞数少见。(1)TTC染色结果：MCAO组和干预组均可见大脑中动脉供血区梗死灶，但瑞替加滨0 h组、瑞替加滨1 h组、瑞替加滨3 h组及瑞替加滨6 h组脑梗死体积均较MCAO组明显缩小，XE991组脑梗死体积较MCAO组明显增大，差异均有统计学意义(P<0.05)；瑞替加滨6 h组较瑞替加滨0 h、瑞替加滨1 h和瑞替加滨3 h组脑梗死体积增大，但差异无统计学意义(P>0.05)。(2)HE染色结果：MCAO组及XE991组海马区脑组织肿胀与坏死明显，瑞替加滨0 h组、瑞替加滨1 h组、瑞替加滨3 h组及瑞替加滨6 h组神经元坏死病理损害明显较轻。(3)Western blotting检测结果：瑞替加滨0 h组、瑞替加滨3 h组缺血半影区CD40L相对表达量均较MACO组明显下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)TUNEL法结果：瑞替加滨0 h组、瑞替加滨1 h组及瑞替加滨3 h组TUNEL阳性细胞数较MCAO组明显减少，XE991组较MCAO组明显增多，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论瑞替加滨对急性脑缺血再灌注损伤有脑保护作用，其机制可能是降低神经元的兴奋性，减轻缺血半影区的炎症反应，从而抑制细胞凋亡。同时这种脑保护作用具有时间依赖性，即超过一定的时间窗，脑保护作用会减弱。