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目的
探讨人骨膜来源细胞在聚乳酸(PLA)三维支架体外培养成骨的可行性及其超微结构特征。
方法取材于成人胫骨骨膜，组织块法分离出骨膜细胞并体外培养传至第3代后进行定向诱导分化为骨膜来源成骨细胞，相差显微镜观察细胞形态特征，分为诱导组和未诱导组，分别在5、10、15、20 d取3个样本，采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒法及钙结节Von Kossa染色法检测ALP和钙结节的表达。经诱导分化的成骨细胞随机分为实验组和对照组，分别接种至经含骨形态发生蛋白-7成骨诱导剂预处理的PLA三维支架和普通二维细胞培养板，1、3、5、7、9、11 d采用CCK-8法测量两组细胞的增殖能力，并绘制生长曲线；3、6、9、12 d电镜下观察细胞在PLA的生长情况和超微形态特征。
结果骨膜来源细胞经诱导分化其形态与成骨细胞相似，诱导组的ALP和钙结节染色阳性率明显高于未诱导组，差异均有统计学意义(P <0.05)。实验组和对照组细胞生长曲线均呈"S"形，实验组对数生长期增殖较快，平稳期细胞数目明显下降，对照组平稳期数目则有上升，差异有统计学意义(P < 0.05)。电子显微镜观察体外骨膜来源成骨细胞具有良好的超微形态学结构。
结论体外骨膜来源成骨细胞与PLA三维支架复合有良好的生物相容性、细胞增殖力和超微形态学结构；体外复合成活后应在第8~9天及时转入体内生长以发挥骨修复作用。