【摘 要】
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犬肥大细胞瘤常表达突变的干细胞因子受体(KIT),使c-kit受体组成性活化,并将导致更严重的疾病。本试验旨在用小干扰RNA(Si RNA)特异性抑制犬KIT mR-NA的表达。将犬beta-2微球
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犬肥大细胞瘤常表达突变的干细胞因子受体(KIT),使c-kit受体组成性活化,并将导致更严重的疾病。本试验旨在用小干扰RNA(Si RNA)特异性抑制犬KIT mR-NA的表达。将犬beta-2微球蛋白(B2 M)、甘油三磷酸脱氢酶(GAPDH)和KIT序列克隆至psiCHECKTM-2载体,质粒DNA与针对基因特异性序列设计的Si RNA分子共转染CHO细胞。通过海肾荧光素酶和萤火虫荧光素酶活性检测,结果显示犬管家基因特异性Si RNA分子抑制了72.0%的B2 M和94.5%的GAPDH;1个针对犬KIT外显子2的Si RNA分子成功抑制了KIT26-407的表达(90.8%抑制);1个针对KIT外显子11中48 bp串联重复序列突变的Si RNA选择性地抑制了KIT1569-1966突变型的表达(93.1%抑制),但对KIT1569-1918野生型的表达没有抑制作用。结果显示RNA干扰能用于抑制犬KIT mRNA的表达,并有可能选择性地针对恶性肥大细胞表达的突变KIT进行抑制。
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