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背景:酒依赖综合征,也称之为酒依赖,酒精中毒等,是一种渐进性易复发的慢性疾病。酒依赖的发生源于经常性地饮酒过量导致对酒精的渴求,对酒精摄入的失控以及停止饮酒产生的一系列负面情绪等等。世界卫生组织推测酒依赖现已成为发展中国家第三大至死因素。在美国,每年用于酒依赖的支出,包括医疗保健、失业、身体损伤及损伤性质判定,约合1850亿美金。在中国,酒依赖患者的比例呈逐年上升的趋势。目前酒依赖已成为全球关注的一个重要的公共卫生问题。酒依赖综合征是一种复杂疾病,酒依赖的发生与生理、心理、环境及遗传因素等有关。目前酒依赖综合征已被公认为是一种多因素的多基因的复杂疾病,包括基因与基因之间以及基因与环境之间的相互作用。传统的多因素与大样本前瞻性研究提示遗传因素在酒依赖的发病中起重要作用。遗传学研究揭示很多特殊的基因与酒依赖的易感性有关。与酒依赖有关的基因主要包括两类:乙醇代谢相关基因(乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶和细胞色素氧化酶2E1)以及神经递质相关基因(γ-氨基丁酸、儿茶酚氧位甲基转移酶、谷氨酸、多巴胺能系统和阿片系统)。多巴胺与愉悦有关,被称为"抗压分子"或"快乐分子"。当多巴胺被释放至突触,它刺激一系列的受体发挥作用。多巴胺能系统中的多巴胺受体D2、多巴胺受体D4和多巴胺转运体的遗传多态性可能与酒依赖有关。然而,多巴胺能系统中相关基因的遗传多态性与酒依赖的相关性目前尚无定论。目的:本研究通过研究多巴胺D2受体基因中TaqIA、TaqIB、-141CIns/Del,多巴胺转运体基因3′末端非编码区40bp可变数目串联重复序列和多巴胺D4受体基因第3外显子上48bpVNTR多态性,探讨多巴胺能系统遗传多态性与酒依赖综合征的相关性,为探索酒精依赖综合征的发病机理及其基因诊断和治疗提供科学的依据。方法:按照DSM-Ⅳ诊断标准选择酒精依赖综合征病例样本。主要的选择标准包括:(1)过去的六个月内日饮酒量超过6听啤酒;(2)年龄在21-79a之间;(3)追溯三代均为云南汉族;(4)有知情同意能力;(5)除烟草和咖啡因依赖以外,过去的6月内没有使用其他成瘾物质;(5)无其他精神疾病,如精神分裂症、重度抑郁症和躁狂抑郁症等。选择与之匹配的非酒依赖个体作为对照样本。共采集病例组样本80例,对照组样本70例。各样本抽取静脉血3ml,EDTA-Na2抗凝处理,通过饱和酚/氯仿法提取DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)分析技术以及聚合酶链式反应-可变数目串联重复序列多态性(PCR-VNTR)分析技术检测酒依赖组和对照组在3个候选基因中的基因型和等位基因频率。应用SPSS15.0和HWSIM软件进行统计学分析。结果:共检测了云南汉族群体三个候选酒依赖相关基因的5个SNP位点,其中病例80,对照70例。DRD2基因TaqIA多态性在病例组和对照组中共检出2种等位基因:A1和A2。3种基因型:TaqIA1/A1、TaqIA1/A2、TaqIA2/A2。其中,患者组中TaqIA1/A1基因型为7例(8.8%),TaqIA1/A2基因型为45例(56.3%),TaqIA2/A2基因型为28例(35%);对照组中TaqIA1/A1基因型为15例(21.4%),TaqIA1/A2基因型为30例(42.9%),TaqIA2/A2基因型为25例(35.7%)。DRD2基因TaqIB多态性在两组中共检出2种等位基因:B1和B2。3种基因型:TaqIB1/B1(野生型纯合子)、TaqIB1/B2(杂合子)、TaqIB2/B2(突变型纯合子)。其中,患者组中TaqIB1/B1基因型为29例(36.3%),TaqIB1/B2基因型为46例(57.5%),TaqIB2/B2基因型为5例(6.3%);对照组中TaqIB1/B1基因型为21例(30%),TaqIB1/B2基因型为33例(47.1%),TaqIB2/B2基因型为16例(22.9%)。DRD2基因-141CIns/Del多态性在两组中共检出2种等位基因:-141CIns和-141CDel。3种基因型:-141CDel/Del、-141CIns/Del、-141CIns/Ins。其中,患者组中-141CDel/Del基因型为1例(1.3%),-141CIns/Del基因型为12例(15%),-141CIns/Ins基因型为67例(83.8%);对照组中只检出2种基因型,即-141CIns/Del和-141CIns/Ins。其中,-141CIns/Del基因型为11例(15.7%),-141CIns/Ins基因型为59例(84.3%)。DAT基因40bpVNTR多态性在两组中共检出4种等位基因:8、10、11和12。观察到5种基因型:11/8、10/10、11/11、11/10、12/11。其中,患者组中11/8基因型为1例(1.3%),10/10基因型为1例(1.3%),11/11基因型为66例(83.5%),11/10基因型为6例(7.5%),12/11基因型为6例(7.5%);对照组中基因型11/8为1例(1.4%),10/10为2例(2.9%),11/11为55例(78.6%),11/10为10例(14.3%),12/11为2例(2.9%)。DRD4基因48bpVNTR多态性在两组中共检出2种等位基因,分别是2和4。观察到2种基因型:2/2和2/4。其中,患者组中2/2基因型为62例(77.5%),2/4基因型为18例(22.5%);对照组中2/2基因型为62例(88.6%),2/4基因型为8例(11.4%)。上述5个候选基因中,DRD2基因TaqIB多态性的基因型和等位基因频率,统计学分析在酒依赖组和对照组中有差异(P<0.05),具有统计学意义。其余4个位点统计学分析差异均无显著性(P>0.05)。研究结果提示TaqIB多态性与酒依赖相关,进一步对TaqIB进行logistic回归分析时,结果显示携带B2等位基因者能显著降低其嗜酒的发生率(OR:0.225,P<0.05)。同时,在对DRD2基因中的TaqIB、DAT基因40bpVNTR和DRD4基因48bpVNTR进行组合基因型分析时,结果显示:以H1(B1-B1-11-11-2-2)组合基因型为参考时,H14(B2-B2-11-11-2-2)属于酒精依赖综合征的一种保护因素(OR:0.133,P<0.05)。结论:本研究提示,在云南地区汉族人群中,DRD2基因TaqIA、-141C以及DRD4基因48bpVNTR和DAT基因40bpVNTR与酒依赖无关联性,而DRD2基因TaqIB多态性与酒依赖存在相关性,携带B2等位基因者能显著降低其嗜酒的发生率。并且,以H1(B1-B1-11-11-2-2)组合基因型为参考时,H14(B2-B2-11-11-2-2)属于酒依赖综合征的一种保护因素。