【摘 要】
：
目的克隆并原核表达扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)结构基因。方法提取扩展青霉总RNA,经RT-PCR扩增PEL结构基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-28a-PEL,转化大
【机 构】
：
吉林大学军需科技学院; 吉林工商学院生物工程分院; 吉林大学人兽共患病教育部重点实验室; 长春长生基因药业股份有限公司;
【基金项目】
：
吉林省教育厅“十一五”科学技术研究项目(吉教科合字[2008]第273号)
论文部分内容阅读
目的克隆并原核表达扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)结构基因。方法提取扩展青霉总RNA,经RT-PCR扩增PEL结构基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-28a-PEL,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式及表达量,包涵体蛋白经变性、复性后,采用NaOH滴定法测定其酶活性。结果经RT-PCR扩增获得约780bp的PEL结构基因;所构建的重组表达质粒pET-28a-PEL经酶切及PCR鉴定正确;目的蛋白的相对分子质量约为28000,以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的10%;发酵液及复性的包涵体蛋白酶活性可达12.44U/ml。结论已成功克隆并原核表达了PEL结构基因,为获得碱性脂肪酶高产基因工程菌株奠定了基础。
其他文献
唐贞观六年,唐代处于太平盛世,群臣奏请太宗前往泰山举行封禅大典,以显文治武功。唯独宰相魏征一人反对,认为此时封禅不妥。"陛下功业虽高,但恩泽尚未遍及全国;国家虽已太平,
近五年来,钙钛矿太阳能电池效率从3.8%提高到20%左右,[1]并且由于其制作成本相对较低,工艺易操作等优点引起了科学界广泛的关注。钙钛矿太阳能电池的吸收层CH3NH3PbI3的薄膜
日本东北大学金属材料研究所和吉田工业共同开发铝、镍，稀土类金属混合体（Mm）和锆系的急冷凝固粉末，通过挤压加工制成挤压材，显示出在200℃以下优异的力学性能。
<正>通风换气是保持室内空气质量的一种非常有效的手段。然而对于使用空调的房间,导入新风必然会使空调负荷增加,通风换气与空调节能成为一对矛盾。近年,作为抑制因导入新风
目的:目前我国高等药学教育与培养社会急需的药师型人才之间存在相当大的差距;为适应社会需要,我们力图建立ITA(Integrated TrainingApproach)教学新模式,提高临床药物治疗学
本文介绍我国近十年来的榕还原技术研究开发情况，主要包括铁浴造气和铁浴熔融还原、含碳球团竖炉预还原、流态化预还原、竖炉终还原、小型联动试验、半工业试验、炼铁合金和不
研究目的:加压力量训练(KAATSUtraining)是一种新兴的训练方法,简称加压训练,又称为血流限制性训练(Blood flow restriction training,BFR),是指在加压限制或短时间断性阻断
用膨胀法测绘了高温再结晶控轧控冷09MAVTiN钢的模拟焊接热影响区(HAZ)连续冷却转变图(SH-CCT曲线)．对各种冷却速度所获显微组织进行了分析，并与15Mn和16Mn钢的相应情况进行了
对利用废毛发制备得到的生物炭进行元素组成、扫描电子显微镜(SEM电镜)等特性的分析,考察其对水中重金属的吸附作用。采用Lagergren模型对Ni(Ⅱ)和Zn(Ⅱ)吸附动力学过程进行
利用热变模拟试验装置，在850-1150℃变形温度，0.1-60 s^-1变形速率条件下，16Mn钢单道次压缩试验得到热变形的流变应力模型为a=4.4^e0.158 e^7.22×10^-5T exp(4383/T)形变激