【摘 要】
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目的 比较正常和糖尿病小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,ADSCs)移植促进皮肤创伤愈合疗效差别.方法 无菌条件下获取正常小鼠及糖尿病小鼠的ADSCs,应用流式细胞术对3代细胞表面抗原CD34、CD45、CD90、CD105进行表型鉴定.应用WST和Transwell迁移实验检测细胞增殖和迁移情况.应用ELISA对正常小鼠及糖尿病小鼠的ADSCs条件培养液中VEGF、HGF和IGF-1蛋白含量进行检测.建立小鼠皮肤创伤模型并随机分为3组,分别以皮内注射方式
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院输血科,辽宁沈阳110004;中国医科大学基础医学院细胞生物学卫生部重点实验室干细胞与再生医学研究室,辽宁沈阳110001
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目的 比较正常和糖尿病小鼠脂肪间充质干细胞(Adipose mesenchymal stem cells,ADSCs)移植促进皮肤创伤愈合疗效差别.方法 无菌条件下获取正常小鼠及糖尿病小鼠的ADSCs,应用流式细胞术对3代细胞表面抗原CD34、CD45、CD90、CD105进行表型鉴定.应用WST和Transwell迁移实验检测细胞增殖和迁移情况.应用ELISA对正常小鼠及糖尿病小鼠的ADSCs条件培养液中VEGF、HGF和IGF-1蛋白含量进行检测.建立小鼠皮肤创伤模型并随机分为3组,分别以皮内注射方式将3代正常小鼠或糖尿病小鼠来源ADSCs的细胞混悬液移植到小鼠创面四周,空白对照组注射生理盐水,于伤后14d观察创面愈合情况;Western blot检测伤后14d创面组织Bcl-2蛋白表达.结果 小鼠ADSCs表达CD90和CD105,不表达CD34和CD45,与正常小鼠相比,糖尿病小鼠来源的ADSCs增殖和迁移能力下降,条件培养液中VEGF、HGF和IGF-1蛋白含量明显降低.糖尿病小鼠ADSCs移植组于创伤后第14d伤口愈合率为(79.6％±6.2％),均显著低于正常小鼠移植组14d的(97.1％±4.1％),两者均高于对照组14d的(64.6％±2.9％,P＜0.05).与正常小鼠移植组相比,糖尿病小鼠移植组伤后14d创面组织Bcl-2表达水平降低,高于对照组创面组织Bcl-2表达水平.结论 正常小鼠来源ADSCs较糖尿病小鼠ADSCs更能促进小鼠皮肤创面愈合.
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