巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程为诱导多能性细胞的研究

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目的 探讨巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程为诱导多能性细胞的方法.方法 应用经典的逆转录病毒介导方法,将Oct4,Sox2,c-Myc和Klf4四种人源性转录因子转导入巴马小型猪的胎儿成纤维细胞中,建立形态和特征类似猪上胚层细胞来源的猪多能性细胞(pig induced pluripotent cells,piPCs).免疫荧光化学方法检测多能性细胞标记物,RT-PCR检测了该细胞体外三胚层相关基因表达水平.结果 巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程的piPCs细胞呈AKP染色阳性,体外长期传代都保持正常的染色体核型,猪上胚层多潜能性细胞标记分子Oct4,Sox2,Nanog,Tra-1-60,Tra-1-81和SSEA-4呈阳性表达,并且表达小鼠胚胎干细胞(ES)多潜能性细胞标记分子SSEA-1,体外诱导分化后具有三胚层特异基因的表达,但是体内分化能力存在缺陷.结论 巴马小型猪胎儿成纤维细胞重编程成功诱导成多能性细胞.
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基于问题的学习(problem-based learning,PBL)是由美国神经病学教授Barrows于1969年创立的一种自主学习模式.经过多年的完善和发展,PBL已经成为国际上公认的、最受欢迎的三大教学方法之一,目前已经成为我国医学教学改革探索的新方向[1].PBL教学法的特点是以问题为基础、以学生为中心、以教师为主导的小组讨论式教学法[2].它强调把学习设置于复杂而有意义的问题情境中,让学生通过合作、交流、探索来解决问题,以培养学生的自学能力、创新能力和团队合作精神,进而提高学生的综合素质[3].
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