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目的 分析双硫仑联合Cu抑制胃癌细胞作用的相关机理.方法 2018年至2019年就诊的确诊胃癌患者,并留取胃癌细胞,体外培养胃癌细胞,用分别不同浓度的双硫仑与Cu对胃癌细胞进行作用,采用MTT法检查胃癌细胞的细胞活力与细胞增殖率,确定各自最佳剂量与效应的关系.研究中采用免疫荧光结合单克隆抗体方法对胃癌细胞进行鉴定.使用相应最佳浓度作用于胃癌细胞后,进行凋亡与自噬相关指标检测:流式细胞仪通过Annexin-V和PI双染色检测Casepas-3、Casepas-8的变化,同时用Western-blot和Realtime-PCR检测凋亡与自噬相关蛋白与基因(Caspase-3、Caspase-8、LC3B)的表达.用免疫荧光法对胃癌相关自噬小体进行定位于半定量分析(LC3B).研究使用SPSS19.0统计软件包分析研究数据.结果 IC50拟合曲线结果胃癌细胞24h的IC50为0.340μmol/L.采用CCK-8法检测联合用药对细胞增殖抑制的剂量依赖性.药物浓度为1,2,3和5μmol/L的抑制率分别为(80.45±0.88)%,(82.98±0.97)%,(81.35±0.95)%和(86.12±0.74)%;可见观察组抑制作用较对照组明显增强.观察组可见流式细胞仪检测在胃癌细胞中,药物浓度为0,1,3和5μmol/L的凋亡率分别为(7.04±0.50)%,(9.03±0.48)%,(13.18±0.65)%和(14.42±0.19)%.药物诱导24h后细胞出现胞体变圆、缩小和脱落.本次研究结果还提示,观察组Casepas-3Casepas-8蛋白表达分别为(8.98±1.09)mL/mg和(3.09±1.31)mL/mg;对照组Casepas-3Casepas-8蛋白表达分别为(13.22±1.43)mL/mg和(16.05±1.55)mL/mg;Casepas-3蛋白表达在观察组显著更低,而Casepas-8蛋白表达则可见在观察组显著更高.Western blot检测观察组胃癌细胞自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ表达,可见在药物0.5、1、2、和4umol/L浓度下,相对表达量分别为(74.90±0.64)、(82.09±0.52)、(90.37±0.62)和(110.64±0.59);此外对照组胃癌细胞该蛋白表达相对表达量为(30.24±0.59).结论 Cu双硫仑联合作用可以充分抑制胃癌细胞并诱导其发生凋亡;主要机理与Cu双硫仑的促进胃癌细胞凋亡达到抑制肿瘤目的的潜在机理与下调Casepas-3蛋白表达以及上调Casepas-8蛋白表达,并进而上调自噬相关蛋白(比如LC3B-Ⅱ)存在关联.