【摘 要】
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目的:研究法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞的抗肿瘤作用,并探讨其诱导凋亡的分子机制.方法:采用MTT(Methy thiazolyl tetrazolium)法观察法尼基转移酶抑制剂Ma
【机 构】
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中山医科大学肿瘤防治中心肿瘤研究所南华大学药物药理研究所;
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目的:研究法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞的抗肿瘤作用,并探讨其诱导凋亡的分子机制.方法:采用MTT(Methy thiazolyl tetrazolium)法观察法尼基转移酶抑制剂Manumycin对肝癌细胞株HepG2细胞增殖的抑制作用,荧光显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞术等技术检测细胞凋亡,应用Western blot方法检测bcl-2、p53、bax的蛋白水平变化.结果:法尼基转移酶抑制剂Manumycin能明显抑制HepG2细胞的生长且呈浓度依赖性,其IC50为(17.65±0.58)μmol/L.荧光显微镜检查显示Manumycin处理的HepG2细胞DAPI染色后,细胞核内可见浓染致密的颗粒荧光,典型细胞可见新月型改变,固缩或片段化的核.DNA凝胶电泳可见典型的DNA梯形带.流式细胞DNA直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,细胞凋亡与Manumycin作用的时间和浓度相关.Manumvcin能时间依赖性地诱导HepG2细胞发生G2/M期阻滞.Manumycin处理HepG2细胞后,Western blot检测结果显示p53蛋白表达明显增加,而bcl-2蛋白和bax蛋白表达无明显变化.结论:法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌细胞株HepG2有强烈的细胞毒作用,其分子机制可能是诱导HepG2细胞凋亡.Manumycin诱导HepG2细胞凋亡与bcl-2蛋白和bax蛋白表达水平无关,而p53蛋白表达水平的上调可能在此过程中起了一定的作用.
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