【摘 要】
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水稻矮缩病毒的非结构蛋白Pns11是一个序列非特异性的核酸结合蛋白,其N端有类似锌指蛋白的结构,C端富含碱性氨基酸.为了研究Pns11的核酸结合活性,构建了两个位于可能的锌指结
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水稻矮缩病毒的非结构蛋白Pns11是一个序列非特异性的核酸结合蛋白,其N端有类似锌指蛋白的结构,C端富含碱性氨基酸.为了研究Pns11的核酸结合活性,构建了两个位于可能的锌指结构内的点突变以及四个分别删除部分碱性区氨基酸片段的缺失突变.经测序验证后分别克隆到大肠杆菌表达载体pBV221中,温度诱导表达.用提取包涵体的方法初步纯化突变体蛋白,Western印迹检测这些突变体和Pns11的抗体均有特异反应.以Southwestern和Northwestern印迹的方法证明六个突变体都保持了核酸结合活性.结果表明N端的类似锌指蛋白的结构不是结合核酸的活性位点,部分缺失C端的碱性氨基酸也不影响其结合.
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