【摘 要】
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目的 探讨清开灵注射液抑制小胶质细胞缺氧活化后,脑微血管内皮细胞Toll样受体4 （TLR4）、gp91phox和闭锁小带蛋白-1 （ZO-1）的表达。方法 小鼠BV2小胶质细胞分为6组。正常组和模型
【机 构】
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北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部和北京市重点实验室; 中国中医科学院广安门医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(No.81173229; No.81673899)
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目的 探讨清开灵注射液抑制小胶质细胞缺氧活化后,脑微血管内皮细胞Toll样受体4 （TLR4）、gp91phox和闭锁小带蛋白-1 （ZO-1）的表达。方法 小鼠BV2小胶质细胞分为6组。正常组和模型组用无血清DMEM培养基培养，低、中、高浓度清开灵组用含清开灵注射液0.0625%、0.125%和0.25%的无血清DMEM培养基培养，米诺环素组用含米诺环素200 nmol/L的无血清DMEM培养基培养。除正常组外，其余各组缺氧24 h后复氧24 h，各组培养液分别加入Balb/c内皮细胞培养液中培养24 h。CCK-8检测内皮细胞活力，比色法检测一氧化氮浓度，Western blotting检测共培养模型内皮细胞TLR4、gp91phox和ZO-1表达。结果 与正常组比较，模型组细胞存活率和ZO-1蛋白的表达明显降低（P <0.01），一氧化氮浓度、TLR4和gp91phox蛋白表达升高（P <0.05）；与模型组比较，各清开灵组和米诺环素组细胞存活率和ZO-1蛋白表达升高（P <0.05），一氧化氮浓度、gp91phox和TLR4蛋白表达降低（P <0.05）。结论 清开灵注射液可通过抑制小胶质细胞缺氧活化，降低脑微血管内皮细胞TLR4和gp91phox蛋白表达，提高ZO-1蛋白表达，提高脑微血管内皮细胞的生存和功能。
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