观察神经干细胞(NSCs)联合神经营养因子-3(NT-3)基因修饰嗅鞘细胞(OECs)移植对颅脑损伤(TBI)大鼠神经修复的作用。
方法取新生乳鼠海马和嗅球原代培养NSCs及OECs并鉴定。用含NT-3基因的慢病毒载体转染OECs，构建NT-3基因修饰OECs(OECs-NT-3)。取50只体重(200±20) g SD成年雄性大鼠(山西医科大学实验动物中心)随机分为假手术组、模型组、OECs-NT-3移植组、NSCs移植组、OECs-NT-3联合NSCs移植组，分组后制作大鼠颅脑损伤模型，给予相应细胞移植处理。细胞移植后1、7、14、28 d行改良神经功能评分(mNSS)，并各时间点取脑组织，制备石蜡切片行苏木精-伊红(HE)染色，原位缺口末端标记法(TUNEL)检测，溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、p75免疫组织化学染色。
结果大鼠mNSS评分：移植28 d，联合组[(4.00±1.05)分]与模型组[(8.50±1.43)分]、OECs-NT-3组[(5.50±1.35)分]、NSCs组[(6.00±1.49)分]比较，差异有统计学意义(t＝－7.997、－2.764、－3.464，P<0.05)，而OECs-NT-3组与NSCs组比较，差异无统计学意义(t＝－0.785，P>0.05)。HE染色示假手术组、模型组、OECs-NT-3组、NSCs组、联合组损伤灶细胞密度依次为(220±22)、(299±47)、(347±35)、(390±72)、(523±55)个/每高倍镜视野。联合组脑组织结构排列相对规整，损伤灶细胞密度较模型组、OECs-NT-3组、NSCs组显著提高，差异有统计学意义(t＝7.246、5.996、3.373，P<0.05)。p75及BrdU免疫组织化学提示两种移植细胞能持续存活且广泛分布在损伤灶周围。移植7 d，假手术组、模型组、OECs-NT-3组、NSCs组、联合组细胞凋亡指数依次为(1.67±0.17)%、(47.49±7.92)%、(31.22±3.97)%、(34.48±4.69)%、(18.17±3.13)%。联合组与模型组、OECs-NT-3组、NSCs组比较，差异有统计学意义(t＝5.963、4.470、5.012，P<0.05)。
结论神经干细胞联合NT-3基因修饰嗅鞘细胞移植可减轻大鼠脑损伤后神经细胞凋亡，修补局部缺损，对神经功能的恢复具有显著促进作用。