组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A对肝癌细胞蛋白质差异表达谱的影响

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目的 观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂-曲古抑菌素A(TSA)对肝癌细胞(BEL-7402)蛋白质表达谱的影响.方法 采用150 g/LTSA处理BEL-7402细胞16hr为试验组,未处理的细胞为对照组,分别抽提其总蛋白质,蛋白定量恒定为200 mg.经第一向固相pH梯度等电聚焦电泳和第二向垂直平板SDS-PAGE,凝胶银染后获得二维凝胶图并扫描输入计算机进行软件分析.将三次重复实验所获得的二维凝胶图进行统计学分析.将差异表达的蛋白质斑点从银染后的二维凝胶中切下,进行质谱分析.结果 实验组BEL-7402细胞90%~95%的蛋白质表达与对照组一致,5%~10%的蛋白质为差异表达;通过质谱对差异点的鉴定,获得了16个差异表达蛋白质,包括:Triosephosphate isomerase、47-KDa heat shock protein、TRAF1,5(up)、annexin A1、Heat shock70 protein、prohibitin、thioredoxin peroxidase、DP-1等分子,这些蛋白质涉及基因表达调控、信号转导、细胞代谢、抑制细胞增殖等众多分子事件.结论 TSA能够通过影响蛋白质的差异表达影响BEL-7402肝癌细胞的生长和增殖.
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