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目的 观察非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)中肺腺癌A549细胞在顺铂(cisplatin, CP)联合雷帕霉素(rapamycin,RAPA)或3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)作用下的结果,为提高顺铂的化疗效果提供理论依据.方法 2013年3月至2014年6月期间,通过对人肺腺癌细胞株A549(由河北医科大学第四医院科研中心提供)经四甲基偶氮唑盐3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT)实验检测顺铂、雷帕霉素和3-MA对A549细胞的增殖抑制率,计算出各药物的50％细胞抑制浓度(50％inhibitory concen-tration,IC50),并以此作为实验浓度.实验分为4组:对照组(无药物干预)、顺铂组(加15μmol/L的顺铂)、顺铂+雷帕霉素组(加10 nmol/L的雷帕霉素1h后再加15 μmol/L的顺铂)、顺铂+3-MA组(加3μmol/L的3-MA 1h后再加15 μmol/L的顺铂),将对数生长期的肺癌A549细胞以每孔1.0×106/ml密度接种于6孔培养板中,待细胞长至孔底面积约70％～80％后分别加入稀释好的药物,分别培养24、48、72 h.肺癌A549细胞的生长迁移情况用细胞划痕实验检测,mTOR、LC3-Ⅱ及Bax mRNA和蛋白的表达情况用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)、Western blot(蛋白质印迹)法检测.数据处理采用SPSS 17.0统计软件进行分析.结果 顺铂IC50:15μmol/L;雷帕霉素IC50:10 nmol/L;3-MA IC50:3 μmol/L.划痕实验显示24 h顺铂+雷帕霉素组细胞迁移能力最弱,48 h和72 h顺铂+3-MA组细胞迁移能力最弱.RT-PCR显示顺铂+雷帕霉素组LC3-ⅡmRNA的2-△△Ct值(24 h:1.686±0.069;48 h:1.803±0.083;72 h:1.836±0.056)与顺铂组(24 h:1.489±0.031;48 h:1.325±0.007;72 h:1.428±0.080)相比表达量均明显上升(24 h F=149.780,P＜0.01;48 h F=111.599,P＜0.01;72 h F=167.855,P＜0.01);而顺铂+3-MA组的Bax mRNA的2-△△Ct值(48 h:1.864±0.104;72 h:1.935±0.068),与顺铂组(48h:1.346±0.080,72 h:1.462±0.029)相比,表达量均明显上升(48 h F=52.853,72 h F=202.118;P值均＜0.01).Western blot显示顺铂+雷帕霉素组LC3-Ⅱ蛋白(48 h:0.556±0.010;72 h:0.571±0.009)与顺铂组(48 h:0.426±0.0107;72 h:0.492±0.009)相比表达量均显著上升(48 h F=372.056,72 h F=930.500;P值均＜0.01);而顺铂+3-MA组的Bax蛋白(48 h:0.897±0.022;72 h:0.916±0.005),与顺铂组(48 h:0.463±0.011;72 h:0.581±0.007)相比,表达量均显著上升(48 h F=1100.412,72 h F=5715.778;P值均＜0.01).结论 顺铂联合雷帕霉素或3-MA较单独使用顺铂能更好的抑制A549细胞的生长,长时间用药时顺铂联合3-MA作用最强.