【摘 要】
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为了探讨透明带与精子的作用机制,人卵透明带3 (human Zona Pellucida 3, hZP3)第191位氨基酸到319位氨基酸之间的cDNA序列通过PCR方法扩增后,克隆到表达载体pPICZαA上,构建
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为了探讨透明带与精子的作用机制,人卵透明带3 (human Zona Pellucida 3, hZP3)第191位氨基酸到319位氨基酸之间的cDNA序列通过PCR方法扩增后,克隆到表达载体pPICZαA上,构建成重组质粒pPICZαA-hZ3.3.该质粒经SacⅠ线性化后电打孔转入Pichia pastoris 酵母X-33中,用YPDS Zeocin+ 筛选高拷贝转化子,并用PCR分析鉴定目的基因片断与酵母基因组的整合,阳性转化子用0.5%甲醇诱导,表达目的蛋白.经SDS-PAGE凝胶电泳和West
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