【摘 要】
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目的 探讨原儿茶酸对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)炎症反应的保护作用及其可能机制.方法 (1)将HPDLF分为空白对照组、脂多糖组、脂多糖+5.00μmol/L原儿茶酸组和脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组.除空白对照组外,其他3组均加入脂多糖(10μg/mL)及不同浓度的原儿茶酸(0μmol/L、5.00μmol/L、10.00μmol/L),均培养24 h后检测相关指标.(2)将HPDLF分为si-NC组、脂多糖+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si
【机 构】
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新疆乌鲁木齐市口腔医院药剂科,乌鲁木齐市 830002;新疆医科大学第五附属医院老年病科,乌鲁木齐市 830011;新疆医科大学基础医学院,乌鲁木齐市 830011
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目的 探讨原儿茶酸对脂多糖诱导的人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)炎症反应的保护作用及其可能机制.方法 (1)将HPDLF分为空白对照组、脂多糖组、脂多糖+5.00μmol/L原儿茶酸组和脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组.除空白对照组外,其他3组均加入脂多糖(10μg/mL)及不同浓度的原儿茶酸(0μmol/L、5.00μmol/L、10.00μmol/L),均培养24 h后检测相关指标.(2)将HPDLF分为si-NC组、脂多糖+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si-SIRT1组.先将si-NC和si-SIRT1转染至HPDLF,除si-NC组外,其他3组均加入脂多糖(10μg/mL),在此基础上,脂多糖+原儿茶酸+si-NC组、脂多糖+原儿茶酸+si-SIRT1组同时加入原儿茶酸(10μmol/L).干预24 h后检测相关指标.采用细胞计数检测法检测HPDLF活力情况,采用流式细胞术检测HPDLF活性氧簇水平,采用蛋白质印迹法检测HPDLF中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(Caspase1)和SIRT1蛋白的表达,采用酶联免疫吸附测定法检测HPDLF中白细胞介素(IL)-1β和IL-18的水平,采用实时荧光定量PCR检测SIRT1 mRNA表达水平.结果 (1)与空白对照组相比,脂多糖+5.00μmol/L原儿茶酸组和脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组细胞活力降低(均P0.05).与空白对照组相比,脂多糖组SIRT1 mRNA和蛋白表达水平降低,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平,TXNIP、NLRP3和激活型Caspase1蛋白表达水平升高(均P<0.05);与脂多糖组相比,脂多糖+5.00μmol/L原儿茶酸组和脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组SIRT1 mRNA和蛋白表达水平升高,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平,TXNIP和激活型Caspase1蛋白表达水平降低,且脂多糖+10.00μmol/L原儿茶酸组细胞NLRP3蛋白表达水平低于脂多糖组(均P<0.05).(2)与si-NC组相比,脂多糖+si-NC组细胞SIRT1蛋白表达水平降低,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平、TXNIP和NLRP3蛋白表达水平升高(均P<0.05);与脂多糖+si-NC组相比,脂多糖+原儿茶酸+si-NC组细胞SIRT1蛋白表达水平升高,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平、TXNIP和NLRP3蛋白表达水平降低(均P<0.05);与脂多糖+原儿茶酸+si-NC组相比,脂多糖+原儿茶酸+si-SIRT1组细胞SIRT1蛋白表达水平降低,而活性氧簇、IL-1β和IL-18水平、TXNIP和NLRP3蛋白表达水平升高(均P<0.05).结论 原儿茶酸可通过上调HPDLF中SIRT1的表达,抑制TXNIP-NLRP3轴的表达,在脂多糖诱导的HPDLF炎症损伤中发挥保护作用.
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