【摘 要】
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目的 探讨沉默信息调控因子1(SIRTl)在脂多糖(LPS)诱导的PC12细胞凋亡过程中的作用. 方法 PC12细胞按不同培养方法分为6组:对照组、250 μg/mL组、500 μg/mL组、750μg/mL组
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目的 探讨沉默信息调控因子1(SIRTl)在脂多糖(LPS)诱导的PC12细胞凋亡过程中的作用. 方法 PC12细胞按不同培养方法分为6组:对照组、250 μg/mL组、500 μg/mL组、750μg/mL组、1000 μg/mL组、1250 μg/mL组；对照组常规培养,后5组添加相应浓度的LPS培养.24 h后MTT法测量细胞存活率,同时确定LPS诱导PC12细胞凋亡的适合浓度.再按选定的浓度培养细胞,并根据培养时间的不同分为6组:对照组、1/2 h组、2h组、18h组、24 h组、48 h组,Hoechst染色及流式细胞仪测量细胞凋亡率.Western blotting检测各组细胞中SIRT1的表达情况. 结果 Hoechst染色结果提示PCl2细胞经LPS培养1/2h后出现凋亡,表现为核固缩、核碎裂;18h开始凋亡小体增多,24h达到高峰,48 h后又有所下降.流式细胞仪检测结果显示各实验组细胞凋亡率与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05),凋亡率变化趋势与Hoechst染色法观察到的结果 一致.Western blotting结果显示对照组SIRTl表达量为1.84±0.04; 1/2 h时SIRT1蛋白表达减低至1.17±0.09;24 h时表达降至最低,为0.62±0.03;48 h组表达量有所回升,达到0.77±0.02;实验组各时间点组与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 LPS可以诱导PC12细胞凋亡,SIRT1在此过程中的表达受到抑制；推测SIRT1在LPS诱导PC12细胞凋亡的过程中起到一定的保护作用.
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