【摘 要】
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通过PCR法直接克隆了2.366kb的人乳铁蛋白基因cDNA序列及800bp的山羊β∕乳球蛋白基因5′端调控序列,并连接到表达载体pLNCX中.利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因cDNA的重组质
【机 构】
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大连理工大学化工学院生物工程系,辽宁师范大学生命科学院,宝生物工程大连有限公司,宝生物工程大连有限公司
【基金项目】
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辽宁省优秀青年科技人才基金，辽宁省大连市科技局资助项目
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通过PCR法直接克隆了2.366kb的人乳铁蛋白基因cDNA序列及800bp的山羊β∕乳球蛋白基因5′端调控序列,并连接到表达载体pLNCX中.利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因cDNA的重组质粒pLNCXHLF,并导入到小鼠乳腺癌细胞株MA∕782中,G418及PCR筛选获得阳性单克隆细胞,增殖后,转染细胞利用海藻酸钠固定化包埋培养,经激素诱导,培养液上清通过Western印记检测证明,转染细胞表达并分泌出人乳铁蛋白,分子质量为34kDa;ELISA法测出,每升培养基(含105个细胞)重组蛋白最高表达量为6
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