【摘 要】
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为建立能表达犬2型腺病毒(CAV-2)E1基因的辅助细胞,本研究用含CAV-2 E1基因的重组质粒pc-E1t对DK细胞进行转染,经G418的筛选,得到26个细胞克隆.用CAV-2 E1A特异引物对各细胞
【机 构】
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成都军区联勤部军事医学研究所,昆明,650032解放军军需大学军事兽医研究所,长春,130062;
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为建立能表达犬2型腺病毒(CAV-2)E1基因的辅助细胞,本研究用含CAV-2 E1基因的重组质粒pc-E1t对DK细胞进行转染,经G418的筛选,得到26个细胞克隆.用CAV-2 E1A特异引物对各细胞克隆进行PCR和RT-PCR检测,PCR结果表明转染后的细胞克隆都能扩增出536bp的特异性片段,但仅有6株为RT-PCR强阳性,能扩增出652bp的特异带.再对RT-PCR强阳性的细胞克隆进行Western blot分析,最终挑选到一个既能转录E1A基因,又能表达E1B 19kD蛋白的克隆细胞株(DK/E1).
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