冷冻对父源印记基因H19DNA甲基化影响的长时程效应研究

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目的检测冷冻及冷冻时间长短对精子的父源印记基因H19印记控制区域(ICR)的DNA甲基化程度的影响.方法以15例健康男性精液为研究对象,将每份精液样品除留少许作为对照外,其余分为两部分(每部分又等分为若干份),一部分连同精浆一起进行程序化冷冻,另一部分则去除精浆后冷冻,并分别于冷冻后1个月、3个月和6个月时,通过亚硫酸氢盐测序PCR的方法分析H19ICR的DNA甲基化状态.结果连同精浆一起冷冻的精子样品,冷冻1个月、3个月和6个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率分别为(13.62±2.06)%、(14.88±1.96)%和(15.89±2.26)%,与对照相比(12.74±2.85)%差异无统计学意义(P>0.05);去除精浆后冷冻的精子样品,冷冻1个月、3个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率分别为(15.24±1.91)%、(13.49±2.63)%,与对照相比差异无统计学意义(P>0.05),而冷冻6个月后,H19ICR的 DNA甲基化丢失率高达(30.92±3.08)%,差异极显著(P
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