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【摘 要】 通过对我院2014年1月-2015年8月临床收治的部分慢性肾功能衰竭、急性脑梗、冠心病、急性白血病等患者进行随机抽取，分别采用流式细胞仪、以3mm、0.8mm标准微球进行对照检测，来展开对血小板及血液微粒进行分析。结果显示，对于慢性肾功能衰竭、急性脑梗、冠心病患者的血小板及微粒数量普遍高于健康者，而急性白血病化疗患者血小板及微粒数量增加不明显，可见，对于血小板及微粒含量来说可以作为临床预测、诊断血栓性疾病的重要参考指标。
【关键词】 血小板 微粒 血栓性疾病 临床检验
在临床检验中，血小板作为最小的细胞成分，在对血栓性疾病进行预测、诊断中具有重要作用。血小板的功能是参与止血和凝血，在临床实践研究中，通过检测来获取血小板及微粒的数量值，有助于探究各种细小微粒在血栓形成中的临床意义。结合临床入院患者，以血小板及微粒检测来判定各类血栓性疾病的发展就显得十分重要。
1 资料及方法
1.1 一般资料
选取2014年1月至2015年8月入住我院的部分慢性肾功能衰竭、急性脑梗、冠心病、急性白血病等患者，来探讨血小板及微粒变化对不同病症的影响。其中慢性肾功能衰竭患者20例，急性腦梗患者18例，冠心病患者22例，急性白血病化疗患者24例，患者年龄范围14-73岁，平均年龄48.5±12.4岁；健康体检30例，年龄范围17-59岁，平均年龄41.3±13.5岁。以上统计性别、年龄无统计学意义，所有患者均符合临床诊治标准。
1.2 检测方法
在进行方法选择上，分别以流式细胞仪、3mm、0.8mm标准微球进行对照检测。具体步骤为：制备样本，对血小板微粒进行标记、定位对照，FCM测定。根据每毫升血浆PMPs的绝对量来进行计算，用N表示。
1.3 统计学处理
对所有数据进行统计学软件处理，获得计量数据以x±s，并利用t检验，当P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 静息血小板释放微粒量分析
从患者分类中发现，慢性肾功能衰竭组患者的检测结果为6.0X105±3.2X105，急性脑梗患者组的检测结果为6.7X105±3.2X105；冠心病患者组血小板微粒检测结果为6.2X105±2.8X105；急性白血病化疗患者组检测结果为1.4X105±5.4X105，健康者体检组血小板微粒含量结果为1.3X105±5.2X105。由此可见，对于急性脑梗、慢性肾功能衰竭、以及冠心病患者来说，其血小板及微粒数量结果与健康者具有显著差异，P<0.05有统计学意义；而对于白血病化疗患者组，其血小板及微粒数量与健康者无差异统计学意义。
2.2 活化血小板释放微粒量分析
在研究中发现，对于体外诱导血小板活化释放微粒量，与静息血小板释放量存在显著差异。结果显示，对于健康患者的静息血小板释放微粒量为1.3×105±5.6×104/毫升，活化后血小板释放微粒量为1.6×106±8.9×105/毫升。
3 讨论
从临床检验来看，对于人体血液内的诸多细胞都存在来源性微粒，而处于不同疾病状态下，人体机体在微粒数量、抗原成分上又存在不同的变化。通过对微粒及来源的定量分析，来探讨不同微粒数量与相应的血栓性疾病之间的关系，为临床诊治提供参考依据。随着现代医疗检测技术的不断发展，对血液中的微粒检测方法也不断革新。本研究采用流式细胞仪为主，结合对照标准微粒来进行来源细胞的标记和表达，并通过特异性标记来进行科学选取，确定不同来源细胞微粒的计算。在检验中，由于微粒与来源细胞之间进行比较时因体积较小，利用流式细胞术可以从散射光中对微粒进行清晰反映，同时，对于外露的磷脂酰丝氨酸，可以采用荧光标记来显示，便于FCM检测方法对血液中微粒的统计和计算，提升了检测准确性。在单克隆抗体制备技术来进行细胞标记，促进了FCM检验在血液中微粒定量及定性分析中得到广泛应用。
从血小板的功能来看，当血管壁受损后，血小板会发生粘附，而在受到诱导，以及发生高切应力时，也会发生活化，其出芽发生多产生囊泡，并以释放或伪足撕裂等方式产生血小板微粒，其直接约为0.1～1.0um。通过分析可知，在磷脂表面，因产生凝血催化而有助于血小板微粒的促凝功能，这也是构成血管受损止血过程的具体变化。针对血栓性疾病，在临床研究中发现，血小板微粒水平与血栓性疾病具有显著关联性，特别是微粒水平增高。由于血小板微粒本身体积较小，利用显微镜可以实现形态学观察，但其富含多种膜糖蛋白，利用免疫学方法，如流式细胞术、酶免疫分析等方法可以对其进行有效识别。从临床疾病与血液中微粒的生物学特性分析中发现，对于血小板、单核细胞、血管内皮细胞活化，以及损伤性疾病，其血液中的微粒多为细胞活化的产物，可以对来源细胞功能进行直接反映，同时也是相关疾病机理发病的直接体现；同时，血液中不同微粒变化，也对临床诊疗预测提供重要参考依据；另外，血液中不同微粒水平在进行疾病诊断中可以提供重要的鉴别依据。
在本研究中，将血小板及微粒作为血栓性疾病的研究依据，特别是在流式细胞术检测应用中较为常见。临床上选用FCM检测方法，多是利用全血法或PRP法，来对相对单位下的血小板微粒进行表达，该方法不利于对实验结果的横向比较，特别是微粒自身携带膜糖蛋白，对血小板微粒自身的干扰影响较大。在本研究中，利用渐进性离心法来制备标本，并通过PFP来检测血小板微粒。其制备过程首先采用70r/min的低速离心机进行PRP制备，再进行固定，降低后续标本在处理中发生活化；而后通过1500r/min离心机对贫血血小板血浆进行制备，最后采用3500r/min高速离心机，来对其他细胞碎片及残存血小板进行剔除，最终获得PFP样本，从而避免血小板对血小板微粒的影响。结合本研究结果，从血栓性疾病患者与健康者血小板及微粒的释放量水平对比分析中，借助于血小板及微粒释放量来进行预测、诊疗血栓性疾病，具有较高的临床评价意义，也是临床工作需要给予关注和全面研究的新方向。
参考文献
[1] 辛晓敏.微粒在血栓性疾病中的作用[J]. 中华检验医学杂志. 2014 （03）.
[2] 贝俊杰，孟璟，胡厚源.血小板微粒与心血管疾病[J]. 中国动脉硬化杂志. 2013（09）.
[3] 饶冬东，张福辉，薛晓光，邱君.血小板微颗粒的促凝功能与流式细胞术绝对计数值的相关性[J]. 中国当代医药. 2015（15）.
[4] 李倩，辛晓敏，金英玉.细胞微粒整体特征的研究进展[J]. 国际检验医学杂志. 2013（19）. 2400
【关键词】 血小板 微粒 血栓性疾病 临床检验
在临床检验中，血小板作为最小的细胞成分，在对血栓性疾病进行预测、诊断中具有重要作用。血小板的功能是参与止血和凝血，在临床实践研究中，通过检测来获取血小板及微粒的数量值，有助于探究各种细小微粒在血栓形成中的临床意义。结合临床入院患者，以血小板及微粒检测来判定各类血栓性疾病的发展就显得十分重要。
1 资料及方法
1.1 一般资料
选取2014年1月至2015年8月入住我院的部分慢性肾功能衰竭、急性脑梗、冠心病、急性白血病等患者，来探讨血小板及微粒变化对不同病症的影响。其中慢性肾功能衰竭患者20例，急性腦梗患者18例，冠心病患者22例，急性白血病化疗患者24例，患者年龄范围14-73岁，平均年龄48.5±12.4岁；健康体检30例，年龄范围17-59岁，平均年龄41.3±13.5岁。以上统计性别、年龄无统计学意义，所有患者均符合临床诊治标准。
1.2 检测方法
在进行方法选择上，分别以流式细胞仪、3mm、0.8mm标准微球进行对照检测。具体步骤为：制备样本，对血小板微粒进行标记、定位对照，FCM测定。根据每毫升血浆PMPs的绝对量来进行计算，用N表示。
1.3 统计学处理
对所有数据进行统计学软件处理，获得计量数据以x±s，并利用t检验，当P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 静息血小板释放微粒量分析
从患者分类中发现，慢性肾功能衰竭组患者的检测结果为6.0X105±3.2X105，急性脑梗患者组的检测结果为6.7X105±3.2X105；冠心病患者组血小板微粒检测结果为6.2X105±2.8X105；急性白血病化疗患者组检测结果为1.4X105±5.4X105，健康者体检组血小板微粒含量结果为1.3X105±5.2X105。由此可见，对于急性脑梗、慢性肾功能衰竭、以及冠心病患者来说，其血小板及微粒数量结果与健康者具有显著差异，P<0.05有统计学意义；而对于白血病化疗患者组，其血小板及微粒数量与健康者无差异统计学意义。
2.2 活化血小板释放微粒量分析
在研究中发现，对于体外诱导血小板活化释放微粒量，与静息血小板释放量存在显著差异。结果显示，对于健康患者的静息血小板释放微粒量为1.3×105±5.6×104/毫升，活化后血小板释放微粒量为1.6×106±8.9×105/毫升。
3 讨论
从临床检验来看，对于人体血液内的诸多细胞都存在来源性微粒，而处于不同疾病状态下，人体机体在微粒数量、抗原成分上又存在不同的变化。通过对微粒及来源的定量分析，来探讨不同微粒数量与相应的血栓性疾病之间的关系，为临床诊治提供参考依据。随着现代医疗检测技术的不断发展，对血液中的微粒检测方法也不断革新。本研究采用流式细胞仪为主，结合对照标准微粒来进行来源细胞的标记和表达，并通过特异性标记来进行科学选取，确定不同来源细胞微粒的计算。在检验中，由于微粒与来源细胞之间进行比较时因体积较小，利用流式细胞术可以从散射光中对微粒进行清晰反映，同时，对于外露的磷脂酰丝氨酸，可以采用荧光标记来显示，便于FCM检测方法对血液中微粒的统计和计算，提升了检测准确性。在单克隆抗体制备技术来进行细胞标记，促进了FCM检验在血液中微粒定量及定性分析中得到广泛应用。
从血小板的功能来看，当血管壁受损后，血小板会发生粘附，而在受到诱导，以及发生高切应力时，也会发生活化，其出芽发生多产生囊泡，并以释放或伪足撕裂等方式产生血小板微粒，其直接约为0.1～1.0um。通过分析可知，在磷脂表面，因产生凝血催化而有助于血小板微粒的促凝功能，这也是构成血管受损止血过程的具体变化。针对血栓性疾病，在临床研究中发现，血小板微粒水平与血栓性疾病具有显著关联性，特别是微粒水平增高。由于血小板微粒本身体积较小，利用显微镜可以实现形态学观察，但其富含多种膜糖蛋白，利用免疫学方法，如流式细胞术、酶免疫分析等方法可以对其进行有效识别。从临床疾病与血液中微粒的生物学特性分析中发现，对于血小板、单核细胞、血管内皮细胞活化，以及损伤性疾病，其血液中的微粒多为细胞活化的产物，可以对来源细胞功能进行直接反映，同时也是相关疾病机理发病的直接体现；同时，血液中不同微粒变化，也对临床诊疗预测提供重要参考依据；另外，血液中不同微粒水平在进行疾病诊断中可以提供重要的鉴别依据。
在本研究中，将血小板及微粒作为血栓性疾病的研究依据，特别是在流式细胞术检测应用中较为常见。临床上选用FCM检测方法，多是利用全血法或PRP法，来对相对单位下的血小板微粒进行表达，该方法不利于对实验结果的横向比较，特别是微粒自身携带膜糖蛋白，对血小板微粒自身的干扰影响较大。在本研究中，利用渐进性离心法来制备标本，并通过PFP来检测血小板微粒。其制备过程首先采用70r/min的低速离心机进行PRP制备，再进行固定，降低后续标本在处理中发生活化；而后通过1500r/min离心机对贫血血小板血浆进行制备，最后采用3500r/min高速离心机，来对其他细胞碎片及残存血小板进行剔除，最终获得PFP样本，从而避免血小板对血小板微粒的影响。结合本研究结果，从血栓性疾病患者与健康者血小板及微粒的释放量水平对比分析中，借助于血小板及微粒释放量来进行预测、诊疗血栓性疾病，具有较高的临床评价意义，也是临床工作需要给予关注和全面研究的新方向。
参考文献
[1] 辛晓敏.微粒在血栓性疾病中的作用[J]. 中华检验医学杂志. 2014 （03）.
[2] 贝俊杰，孟璟，胡厚源.血小板微粒与心血管疾病[J]. 中国动脉硬化杂志. 2013（09）.
[3] 饶冬东，张福辉，薛晓光，邱君.血小板微颗粒的促凝功能与流式细胞术绝对计数值的相关性[J]. 中国当代医药. 2015（15）.
[4] 李倩，辛晓敏，金英玉.细胞微粒整体特征的研究进展[J]. 国际检验医学杂志. 2013（19）. 2400