【摘 要】
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通过设计简并引物,从Paenibacillus macerans YLW菌株中克隆到其α-环糊精葡萄糖基转移酶（α-CGTase）基因,构建重组质粒α-CGTase-p ET28a（＋）,转化大肠杆菌BL21（DE3）,得到重组菌株α
【基金项目】
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陕西省科学院应用基础研究项目（2013K-09）,陕西省科学院科学技术平台项目（2015k-33）
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通过设计简并引物,从Paenibacillus macerans YLW菌株中克隆到其α-环糊精葡萄糖基转移酶（α-CGTase）基因,构建重组质粒α-CGTase-p ET28a（＋）,转化大肠杆菌BL21（DE3）,得到重组菌株α-CGTase-p ET28a/BL21（DE3）。在16℃,1m M IPTG条件下诱导15 h,实现了α-CGTase的可溶性表达,胞内酶活达到10046U/m L,是野生菌株胞外酶活的3.25倍。经镍柱一步法亲和纯化α-CGTase后,酶蛋白纯化了6.05倍,酶收率28
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