【摘 要】
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为了准确鉴别猪流感病毒(SIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的感染,本研究建立了可同时检测和鉴别SIV、NA-PRRSV和EU-PRRSV的一步法多重荧光RT-PCR方法,并进行了临床应用.
【机 构】
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中国海关科学技术研究中心,北京100026
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为了准确鉴别猪流感病毒(SIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的感染,本研究建立了可同时检测和鉴别SIV、NA-PRRSV和EU-PRRSV的一步法多重荧光RT-PCR方法,并进行了临床应用.研究结果表明,所建立的多重荧光RT-PCR最低检测限可达1?10 copies/μL,特异性为100％.SIV、NA-PRRSV和EU-PRRSV单荧光RT-PCR与多重荧光RT-PCR相比,相关性系数R2值大于0.999,所有扩增效率E值均在90％?100％之间,扩增性能良好,多重混合对特异性和敏感性未产生明显干扰.对病毒核酸样品的验证100％符合,从89份NA-PRRSV阳性样品中检测出NA-PRRSV阳性88份(88/89),从28份SIV阳性样品中检测出SIV阳性28份(28/28),从这两类阳性样品中检测出SIV和NA-PRRSV双阳性4份(4/117);从82份NA-PRRSV阴性样品中检测到EU-PRRSV和SIV阳性各1份;从105份未知感染状态的临床样品中筛查出2份SIV阳性和3份NA-PRRSV阳性.本研究建立的多重荧光RT-PCR方法实现了一次检测同时鉴别多种病毒的目的,适用于猪流感和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的快速筛查.
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