目的 检测骨形态发生蛋白7(BMP-7)对缺氧诱导的肝癌细胞上皮细胞间质转化(EMT)及细胞体外侵袭能力增强的调控作用,探讨逆转肝癌EMT,降低其转移潜能的途径.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测正常和缺氧状态(O2浓度1％)下1种肝癌SMMC-7721细胞的3种上皮/基质表型标志物黏附蛋白(E-cadherin)、Snail和波形蛋白(Vimentin)的mRNA和蛋白表达变化,凝胶成像系统MUVB-20对RT-PCR和Western blot结果行半定量分析,Transwell侵袭小室测定细胞跨膜侵袭能力.同样方法观察BMP-7(50μg/L)对细胞上皮/基质表型标志物表达,以及侵袭能力的影响.结果 SMMC-7721细胞缺氧培养后E-cadherin mRNA表达减少而Snail和Vimentin表达增加,呈时间依赖性(P＜0.05),24h后前者相对表达量由1.299±0.095降至0.542 ±0.092(P ＜0.05)；后两者则分别由0.189 ±0.021和0.182 ±0.046增加至0.715±0.053和0.773±0.064.相应的,E-cadherin蛋白相对表达量由0.806±0.093降至0.456±0.074,Vimentin由0.471 ±0.091增至0.831 ±0.057.此外,缺氧培养后细胞侵袭能力明显增强,呈时间依赖关系(P＜0.05),24h后穿过Transwell小室滤膜的细胞数由32.33±3.22增加至76.67±7.09.BMP-7处理24 h后,与对照组比较,E-cadherin mRNA和蛋白表达均增高,而Snail和Vimentin的表达则均减少,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).而且,BMP-7处理后细胞跨膜细胞数明显减少,由75.43±7.76下降至33.34±5.86(P ＜0.05).结论 BMP-7可逆转缺氧诱导的肝癌细胞EMT,降低其体外侵袭能力,可能作为抑制肝癌转移的新靶点。
骨形态发生蛋白7逆转缺氧诱导的肝癌细胞上皮细胞间质转化
【摘 要】
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目的 检测骨形态发生蛋白7(BMP-7)对缺氧诱导的肝癌细胞上皮细胞间质转化(EMT)及细胞体外侵袭能力增强的调控作用,探讨逆转肝癌EMT,降低其转移潜能的途径.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测正常和缺氧状态(O2浓度1％)下1种肝癌SMMC-7721细胞的3种上皮/基质表型标志物黏附蛋白(E-cadherin)、Snail和波形蛋白(Vimentin)
【机 构】
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430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,430030武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科,430030武
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2012年29期
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