人血清白蛋白与PTH(1-34)融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及鉴定

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目的:在毕赤酵母中高效分泌表达人血清白蛋白与PTH(1—34)融合蛋白。方法;利用PCR技术获得HSA和PTH(1—34)基因,以柔性连接肽相连插入到表达载体pPIC9,重组质粒线性化后,用化学法转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺陷型培养板和PCR鉴定筛选得到转化子。在启动子AoX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白HSA—PTH(1—34)。PCR法和电泳鉴定表达验证阳性转化子,并观测不同时间点的表达量。Western blot验证其免疫活性,在兔肾皮质细胞膜中测定腺苷酸环化酶的墩活产生cAM
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