猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因在毕赤酵母中的表达

来源 :城市道桥与防洪 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong539

【摘要】

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采用RT-PCR方法从猪囊尾蚴总RNA中扩增出TsCL-1基因并构建了真核表达载体pPIC9K-TsCL-1,pPIC9K-TsCL-1电转化毕赤酵母GS115.采用G418抗性梯度筛选多拷贝重组菌株,经甲醇诱导

【作者】

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刘琼 LUO Xue-nong 郭爱疆 ZHENG Ya-dong 潘晓梅 YUE Cheng 才学鹏

【机构】

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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046新疆农业大学,动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052;中国农业科学院兰州兽医研究所

【出处】

：

城市道桥与防洪

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

：

猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶毕赤酵母

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采用RT-PCR方法从猪囊尾蚴总RNA中扩增出TsCL-1基因并构建了真核表达载体pPIC9K-TsCL-1,pPIC9K-TsCL-1电转化毕赤酵母GS115.采用G418抗性梯度筛选多拷贝重组菌株,经甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot分析重组蛋白的表达情况.结果显示,TsCL-1与GenBank登录的TsCL的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.8%和100%,与肝片吸虫和大片吸虫组织蛋白酶氨基酸的同源性为76.3%.TsCL-1基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物的分子质量为42 ku左右;Western-blot分析表明,表达产物具有反应原性.

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