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ES细胞体外生长的环境要求极为苛刻．原则上应满足两个条件：①促进细胞的分裂增殖；②抑制细胞的分化．前者受到基本培养基、添加剂，血清和生长因子的影响，后者则涉及到动物早期胚胎的胚龄和饲养层细胞种类的选择、条件培养基和生长因子的运用以及其它类型细胞(如滋胚层细胞)的影响．不同动物胚胎在体内发育有不同特点．对体外生长的环境要求不同，针对不同动物，应采取相应的策略，才能建立起真正的ES细胞．