人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loongzhou
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目的:克隆人IL-24基因,构建真核表达载体,在COS-7细胞中进行表达,并检测重组表达蛋白hIL-24的抗肿瘤活性.方法:分离人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR技术克隆人IL-24基因,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列,构建真核重组表达载体pcDNA3-hIL-24,进行双酶切和PCR鉴定,以质粒pcDNA3-hIL-24转染COS-7细胞进行瞬时表达,用RT-PCR检测mRNA表达,并用MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性.结果:成功
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