长期低剂量氯氰菊酯对小鼠卵巢功能的影响

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目的 探讨长期低剂量氯氰菊酯(CYP)暴露对小鼠卵巢功能的影响。方法 研究分为体内实验和体外实验。体内实验,将15只体重为17~19 g的3周龄ICR雌性小鼠随机分为3组,每组5只,予以0.02 mg·kg-1·d-1 CYP的为极低剂量组,予以0.2 mg·kg-1·d-1 CYP的为低剂量组,予以0.01%无水乙醇的为对照组,连续处理6个月。于第6个月观察小鼠动情周期,检测血清卵泡刺激素(FSH)和抗苗勒管激素(AMH)水平,分离单侧卵巢组织进行卵泡计数。体外实验,3周龄ICR雌鼠腹腔注射10 U孕马血清促性腺素(PMSG)46~48 h后获取未成熟卵丘-卵母细胞复合体(COCs),分别置于0μmol/L CYP+体外成熟(IVM)培养液(对照组)、100μmol/L CYP+IVM培养液(极低剂量组)和200μmol/L CYP+IVM培养液(低剂量组)中处理16~18 h后,计数MⅡ卵母细胞,并分析各组卵母细胞第一极体(PB1)排出率、活性氧(ROS)及线粒体膜电位情况。结果 体内实验结果显示,与对照组比较,极低剂量组和低剂量组小鼠体重、子宫系数未见明显改变,卵巢系数稍有减少,但差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,低剂量组小鼠动情周期紊乱,血清FSH水平显著升高[(17.53±4.04)U/L vs.(5.67±0.52)U/L,P<0.05],AMH水平显著下降[(0.47±0.15)ng/ml vs.(1.41±0.24)ng/ml,P<0.05],窦卵泡数显著减少[(22.80±4.49)个vs.(84.00±14.98)个,P<0.05],其余各级卵泡数比较无显著性差异(P>0.05)。体外实验结果显示,与对照组比较,低剂量组卵母细胞PB1排出率和卵母细胞线粒体膜电位显著下降(P<0.05),卵母细胞内ROS水平显著升高(P<0.05)。结论 长期低剂量(0.2 mg·kg-1·d-1)CYP暴露可通过影响卵母细胞的发育导致卵巢储备功能下降。
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