蔗糖异构酶产生菌的常压室温等离子体诱变育种及发酵条件优化

来源 :河南工业大学学报(自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woaixuyong
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蔗糖异构酶(sucrose isomerase, SIase)是一种以蔗糖为原料,通过分子内转糖基化产生非致癌性异麦芽酮糖的重要工业酶。为获得高SIase酶活的优质菌株,以Erwinia rhapontici YS-1为初始菌株,利用常压室温等离子体(ARTP)技术,在电源功率300 W、温度28℃、照射距离2 mm、工作气体流量12.0 L/min的条件下对菌株照射处理50 s,通过测定突变菌株的SIase酶活及菌体絮凝效果,筛选出目的菌株。为进一步提高突变菌株SIase酶活,在单因素试验基础上,应用响应面Box-Behnken试验设计优化目的菌株的发酵条件。结果表明:经多轮、多批次诱变后共得到380株突变菌株,从中筛选得到一株发酵液黏度低、SIase酶活较原始菌株YS-1(1.34 U/mL)提高10.01倍的突变菌株DXL-13(14.75 U/mL);响应面试验建立了蔗糖质量浓度、Na2HPO4·12H2O质量浓度、发酵时间的二次回归方程,得出突变株DXL-13的最佳培养条件为蔗糖质量浓度76 g/L、Na2HPO4·12H2O质量浓度2.7 g/L、发酵时间12.5 h、pH 6.0。最终得到SIase酶活为41.14 U/mL,较原始菌株酶活提高了29.70倍。
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