【摘 要】
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目的构建miR-181a真核表达载体,获得食管癌细胞TE11在其中稳定表达的细胞系,为研究miR-181a的功能以及其在食管癌细胞TE11中的作用机制奠定基础。方法根据miR-181a成熟序列在
【机 构】
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河北医科大学第二医院病理科,新疆自治区人民医院分院检验科,天津胸科医院胸外科,天津市公安医院检验科,河北医科大学第二医院胸外科
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目的构建miR-181a真核表达载体,获得食管癌细胞TE11在其中稳定表达的细胞系,为研究miR-181a的功能以及其在食管癌细胞TE11中的作用机制奠定基础。方法根据miR-181a成熟序列在基因组中的位置及其上下游250个碱基序列,以293T细胞基因组DNA为模板设计PCR引物,扩增包含miR-181a前体的序列,连接到线性化的pMD18-TSimple载体中,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后亚克隆到pcDNA3.1（＋）中,并对重组质粒进行双酶切和测序分析;鉴定完全正确的重组质粒转染食管癌细胞TE1
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