【摘 要】
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RNA介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统由单链引导RNA（sgRNA）与核酸酶Cas9构成。在细胞内，sgRNA能够按照碱基互补配对的原则引导Cas9与靶点结合，由Cas9切割目标DNA，造成双链DNA断裂（double stranded break,DSB）。在随后的DNA修复过程中，细胞主要进行非同源末端连接（non-homologous end joining,NHEJ）或在有修复模板
【基金项目】
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国家自然科学基金杰出青年基金项目（编号：32025023）;国家自然科学基金面上项目（编号：81873685,31971366）； 国家重点研发计划项目（编号：2019YFA0110802,2019YFA0802802）； 上海市科技创新行动计划实验项目（编号：20140900200）；
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RNA介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统由单链引导RNA（sgRNA）与核酸酶Cas9构成。在细胞内，sgRNA能够按照碱基互补配对的原则引导Cas9与靶点结合，由Cas9切割目标DNA，造成双链DNA断裂（double stranded break,DSB）。在随后的DNA修复过程中，细胞主要进行非同源末端连接（non-homologous end joining,NHEJ）或在有修复模板存在的情况下进行重组修复（homologydirectedrepair,HDR）。如果将CRISPR/Cas9系统以及修复模板通过显微注射的方式导入大鼠的胚胎内，就能借助细胞的修复机制实现大鼠胚胎的基因编辑，由此构建各种基因修饰大鼠模型。本文详细介绍了利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建大鼠模型的具体操作步骤，以期为相关领域的科研人员提供一种大鼠基因修饰模型的构建方法。
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