【摘 要】
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为建立一种可准确、快速鉴定畜禽临床病例中3种常见革兰氏阴性杆菌的多重PCR检测方法,本试验针对大肠埃希菌23SrRNA基因、巴氏杆菌KMT基因和沙门氏菌invA基因分别设计合成了1
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州省动物疫病预防控制中心,贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室
【基金项目】
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贵州省农业攻关项目(黔科合NY[2014]3042号);贵州省科技创新人才团队项目(黔科合人才团队[2015]4016号)
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为建立一种可准确、快速鉴定畜禽临床病例中3种常见革兰氏阴性杆菌的多重PCR检测方法,本试验针对大肠埃希菌23SrRNA基因、巴氏杆菌KMT基因和沙门氏菌invA基因分别设计合成了1对特异性引物,构建可同时快速鉴别大肠埃希菌、巴氏杆菌和沙门氏菌的多重PCR反应体系,并进行反应条件优化及方法性能评估。结果显示,所建立的方法最佳引物浓度分别为1.0、1.5和1.0μmol/L,最佳退火温度为56℃。性能评价结果显示,所建立的多重PCR检测方法具有较好的特异性和敏感性,其中对沙门氏菌检测敏感性最高,为1.44pg
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