【摘 要】
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目的 观察不同浓度的血小板衍生因子BB(PDGFBB)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人肌腱细胞的表型和表型标志物基因表达的影响.方法 存添加1％胎牛血清(FBS)的α-MEM培养基中,加入PDGFBB(50g/L)、bFGF(50 μg/L)以及50 μg/L PDGFBB+50 μg/L bFGF,使用10％的FBS为阳性对照,用天狼星红染色细胞观察细胞表型变化,在细胞培养第14天提取各
【机 构】
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300052天津医科大学总医院普通外科,300052天津医科大学总医院心血管外科,300052天津医科大学总医院内分泌实验室,300052天津医科大学总医院内分泌实验室,300052天津医科大学总医院
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目的 观察不同浓度的血小板衍生因子BB(PDGFBB)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人肌腱细胞的表型和表型标志物基因表达的影响.方法 存添加1％胎牛血清(FBS)的α-MEM培养基中,加入PDGFBB(50g/L)、bFGF(50 μg/L)以及50 μg/L PDGFBB+50 μg/L bFGF,使用10％的FBS为阳性对照,用天狼星红染色细胞观察细胞表型变化,在细胞培养第14天提取各组细胞mRNA,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)的方法测定人肌腱细胞表型及分化标志物基因表达.结果 在添加了1％ FBS条件下,各实验组及对照组细胞形态均未发现表型变异,与阳性对照组比较,1％ FBS+50 μg/L PDGFBB+50 μg/L bF(GF组的细胞形态呈现出较弱分化,产生胶原较少,胶原纤维的排列杂乱没有阳性对照那样的浓密有序及平型排列的胶原纤维形态.与阳性对照组比较,1％ FBS+50 μg/L PDGFBB +50 μg/L bFGF组的肌腱细胞表型标志物的基因表达的比值明显下调[Scleraxis(Scx)和Decorin (Dcn)0.33,t=374.055;Tenomodulin(Tnmd)0.003,t=28 199.418;Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)0.57,t=164.195; Dcn 0.26,t=177.520],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 使用1％ FBS的α-MEM培养基中添加50 μg/LPDGFBB+50 μg/L bFGF可维持人肌腱细胞表型,胶原纤维产生较添加10％ FBS培养的细胞明显减少,同时下调肌腱细胞的表型及分化标志物的mRNA表达。
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